一个研究小组发现,甜叶菊提取物中的关键化合物莱鲍迪苷 C (Reb C) 可以通过化学酶改性来增强其甜度。研究人员利用工程糖合酶将葡萄糖和半乳糖部分添加到 Reb C 中,为食品和饮料行业改进甜味剂配方铺平了道路。
甜叶菊是一种原产于南美洲的植物,因其甜味甜菊糖苷而闻名,这种糖苷比蔗糖甜 100-150 倍。这些糖苷,包括甜菊苷和莱鲍迪苷 A,已成为流行的天然甜味剂。然而,莱鲍迪苷 C (Reb C) 虽然是甜叶菊中最丰富的化合物之一,但甜度较低,回味苦涩。
为了提高 Reb C 的甜度和感官吸引力,研究人员专注于改变其糖基化模式,这种策略可以增强相关化合物的甜度。
2024 年 3 月 1 日发表在《食品材料研究》上的一项研究扩大了可用于产品配方的甜菊糖苷的范围,从而可以更大程度地定制甜味剂混合物。
在这项研究中,研究人员开发了一种化学酶法来提高 Reb C 的甜度。研究人员专注于两种糖基合成酶 StspBGlcE383A 和 AgtuBGlcE358S 的表达和纯化,并使用 SDS-PAGE 和镍螯合亲和层析对其进行评估,以确保正确的蛋白质表达。
随后,该团队合成了关键中间体,包括 1,2,3,4,6-五-O-乙酰葡萄糖和 1,2,3,4,6-五-O-乙酰半乳糖,然后合成了它们的 1-氟化衍生物。这些化合物作为酶促糖基化的供体底物。研究人员随后脱去这些底物的保护基,并将其用于对莱鲍迪苷 C (Reb C) 的酶促糖基化反应,莱鲍迪苷 C 是一种甜菊糖苷,与其他莱鲍迪苷相比,甜度相对较低。
糖基合成酶成功地将葡萄糖和半乳糖部分添加到 Reb C 中,其中 AgtuBGlcE358S 效率更高,最多可添加三个半乳糖或两个葡萄糖单元。这些修饰通过 LC-ESI-MS 得到确认,结果显示成功附加了额外的糖单元。